Dados do Trabalho

Título

Inibição da replicação do SARS-CoV-2 pela Hipericina em modelo de infecção in vitro

Introdução

Atualmente, as opções de tratamento para COVID-19 já estão disponíveis, porém apresentam limitações. A busca por novos compostos antivirais mais potentes ou com propriedades imunomoduladoras e anti-inflamatórias é fundamental para ampliar as opções terapêuticas. Estudos prévios mostram que o composto Hipericina apresenta atividade anti-SARS-CoV-2, sendo essencial a compreensão de seu mecanismo de ação antiviral.

Objetivo (s)

Neste contexto, propomos caracterizar a atividade da Hipericina em relação a sua capacidade de inibir a replicação do vírus SARS-CoV-2 e identificar seu mecanismo de ação antiviral em modelo de infecção in vitro.

Material e Métodos

Para caracterizar a atividade anti-SARS-CoV-2 da Hipericina, utilizamos células Vero E6 infectadas com o isolado original de SARS-CoV-2 e suas variantes (gama, delta e ômicron), que foram tratadas com diferentes concentrações de Hipericina (0,02-2000 nM) por 48 horas. Para elucidar o mecanismo de ação do composto antiviral, realizamos ensaio de tempo de adição, com tratamento das células infectadas com 200 nM da Hipericina, nas seguintes condições: tratamento total (1), pré-tratamento das células (2), pré-tratamento dos vírus a 4 °C, 20 °C e 37 °C (3), tratamento durante a infecção (4) e tratamento pós-infecção (5). A análise da capacidade de redução da replicação viral em ambos os experimentos foi feita a partir da titulação viral por ensaio de placas de lise.

Resultados e Conclusão

Observamos uma redução significativa da titulação viral de forma dose dependente para todas as diferentes variantes do SARS-CoV-2 testadas, com IC50 da Hipericina de aproximadamente 1 nM. A condição 1, utilizada como parâmetro de comparação, apresentou redução total dos títulos virais. Não observamos alterações na replicação viral na condição 2, indicando que a Hipericina não bloquearia componentes celulares que tenham interação viral. Para as condições 3 e 4, foi observada uma redução significativa do título viral, o que indica a possível atividade virucida do fármaco independentemente da temperatura e/ou inibição da adsorção viral. Apesar disso, nestas condições, a redução do título foi menor que na condição 1. A condição 5 também apresentou a atividade antiviral da Hipericina em sua máxima eficácia, porque inibiu completamente a replicação viral. Deste modo, concluímos que a Hipericina apresenta importantes atividades antivirais e virucidas. Nossas perspectivas consistem em realizar tratamento de células infectadas com outros fármacos antivirais potentes contra o SARS-CoV-2.

Palavras Chave

Hipericina; antiviral; SARS-CoV-2; COVID-19; in vitro