Dados do Trabalho

Título

Avaliação dos efeitos citopatológicos de toxinas Cry de um novo isolado de Lysinibacillus sphaericus I5A9, de Pernambuco, sobre o intestino de larvas de Culex quinquefasciatus suscetíveis e resistentes a toxina binária.

Introdução

A identificação de novas toxinas mosquitocidas em um novo isolado de Lysinibacillus sphaericus (Ls) I5A9 de Pernambuco, despertou o interesse de investigação de seu potencial larvicida para mosquitos. O isolado I5A9 possui genes que codificam para as toxinas BinA/BinB, Cry48Aa/Cry49Aa e para duas toxinas Cry22Aa-like. O modo de ação desse complexo de toxinas ainda não foi esclarecido, mas uma característica notável é a toxicidade para C. quinquefasciatus resistente à toxina Bin, que é o principal fator inseticida de larvicidas à base de Ls.

Objetivo (s)

Caracterizar os efeitos citopatológicos das toxinas produzidas em cultivos esporulados de LsI5A9 sobre o epitélio intestinal de larvas de C. quinquefasciatus suscetíveis e resistentes à toxina Bin.

Material e Métodos

Para isso, larvas de 4° estádio de C. quinquefasciatus das colônias suscetível (CqSLab) e resistente (Rec2) à toxina Bin, foram expostas por 6 e 12h a CL90 de preparações de LsI5A9 e de Ls2362, estabelecidas para cada colônia. A ultraestrutura das células epiteliais do intestino médio das larvas foi avaliada por microscopia eletrônica de transmissão (MET). O estudo não necessitou de aprovação do comitê de ética e pesquisa animal.

Resultados e Conclusão

A exposição da colônia CqSLab a CL90 do LsI5A9 de 0,006 mg/L por 6h, provocou alterações mitocondriais e destruição total das microvilosidades, enquanto a exposição a CL90 do Ls2362 de 0,015 mg/L por 6h, evidenciou o início de uma fragmentação de microvilosidades. Em 12h de exposição, observou-se a intensificação dos danos provocados por LsI5A9 com destruição do reticulo endoplasmático (RE) enquanto o Ls2362 apresentou apenas entumecimento mitocondrial e fragmentação do RE mantendo microvilosidades abundantes. Para a colônia Rec2, exposta ao Ls2362 por 6 e 12h, não foi observado nenhum dano celular. Em contrapartida, a exposição por 12h de larvas da colônia Rec2 a CL90 de 0,39 mg/L de LsI5A9 evidenciou entumecimento mitocondrial e intensa destruição das microvilosidades e do RE. O efeito citotóxico peculiar para a colônia Rec2 pode estar relacionado ao complexo de toxinas produzidas pela cepa I5A9 que estão ausentes no Ls2362.

Palavras Chave

Biolarvicidas; toxinas Cry; citotoxicidade.