Dados do Trabalho

Título

Avaliação do potencial de membrana mitocondrial e detecção de corpos lipídicos em formas amastigotas de Leishmania amazonensis tratadas com Cloroquina

Introdução

A Leishmaniose Tegumentar é uma doença parasitária que faz parte do conjunto de doenças tropicais negligenciadas. Presente em vários países, esta acomete cerca de 600 mil a 1 milhão de pessoas anualmente, com maior incidência em países subdesenvolvidos. Ocasionada por protozoários do gênero Leishmania spp., ela é diferenciada pelos aspectos das lesões em cutânea e visceral. No seu tratamento, os principais fármacos utilizados são os antimoniais pentavalentes (Glucantime®), Pentamidina® e Anfotericina B. No entanto, estes apresentam reações adversas e efeitos colaterais variados associados ao seu uso, resultando em uma necessidade do desenvolvimento de novos medicamentos leishmanicidas que sejam mais seguros, acessíveis e eficazes no combate a essa doença. Nesse contexto, o reposicionamento de fármacos antimaláricos com ação comprovada em outros protozoários, emergem como uma opção promissora para a leishmaniose.

Objetivo (s)

O objetivo deste estudo é, detectar os possíveis mecanismos de ação da CQ, no processo de morte celular em formas amastigotas de Leishmania (L.) amazonensis.

Material e Métodos

Para avaliar o mecanismo de ação, foi utilizada a linhagem celular THP-1 (monócitos humanos), na sua forma aderente (macrófago), em placas de 6 poços (6x10⁵ céls/mL). Após a diferenciação, as células foram infectadas com formas promastigotas de Leishmania (L.) amazonensis na proporção 1:10 (6x10⁶). Em seguida, as amastigotas de L. (L.) amazonensis foram expostas por 24 horas ao tratamento com CQ nas concentrações obtidas previamente que inibiram em 50% o crescimento do parasito (IC₅₀) e duas vezes esse valor (2x IC₅₀). A influência da CQ sobre o potencial de membrana mitocondrial e detecção de corpos lipídicos em formas amastigotas foi avaliada por espectrofotometria de fluorescência utilizando os marcadores Rodamina 123 e Vermelho do Nilo, respectivamente. 

Resultados e Conclusão

Os resultados obtidos indicaram que a CQ provocou alterações no potencial de membrana mitocondrial em ambas as concentrações testadas. Em relação ao mecanismo de detecção corpos lipídicos, somente a concentração de 2x IC₅₀ induziu um aumento significativo com relação ao controle negativo (parasitos não tratados). Esses dados sugerem que a CQ induz a morte da Leishmania por vias semelhantes à apoptose. No entanto, outros estudos complementares deverão ser realizados para elucidar outras vias de mecanismos de morte, a fim de possibilitar estudos comparativos mais abrangentes.

Palavras Chave

Cloroquina; reposicionamento; Leishmania; mecanismo de ação.