Dados do Trabalho

Título

Frequência de mutações no gene ribD do Mycobacterium leprae em pacientes atendidos em uma fundação de referência no Amazonas

Introdução

A hanseníase é uma doença infecciosa crônica, causada pelo Mycobacterium leprae e também pelo M. lepromatosis, que atinge nervos e pele. Desde a década de 60, há diversos relatos de casos de resistência aos antimicrobianos (RAM) em hanseníase. Fatores como o tratamento irregular e/ou abandono de tratamento podem favorecer o surgimento de alterações genéticas em genes associados à RAM. Múltiplos genes já foram associados com a RAM em hanseníase, porém a busca por novos alvos é de fundamental importância para a definição da melhor conduta terapêutica. Novos estudos sugerem a participação de novos genes na RAM, dentre eles o gene ribD, que codifica uma enzima diidrofolato redutase alternativa, mecanismo associado com a RAM à dapsona. 

Objetivo (s)

Investigar a frequência de mutações no gene ribD do M. leprae em pacientes atendidos em uma fundação de referência em dermatologia no Amazonas.

Material e Métodos

Foram incluídas 100 amostras de biopsias de pacientes provenientes do fluxo contínuo de investigação da RAM em pacientes da Fundação Hospitalar Alfredo da Matta, sendo 73 com suspeita de recidiva e 27 casos novos. O DNA, extraído por meio de kit comercial, foi amplificado por PCR convencional para análise do gene ribD. Após amplificação, as amostras foram submetidas à reação de sequenciamento de DNA e eletroforese capilar no equipamento Seqstudio, da Applied biosystems. As sequências foram analisadas com o Software Mega Versão 11. Este estudo foi aprovado pelo CEP/FUHAM, sob o CAAE: 68098817.4.0000.0002. 

Resultados e Conclusão

Dos 23 casos novos, 14 não apresentaram amplificação do DNA alvo, impossibilitando assim a análise de sua sequência. As 13 amostras restantes tiveram seu DNA sequenciado, não apresentando mutações em sua sequência. Entre os pacientes com suspeita de recidiva, foram excluídas da análise 23 amostras, por não haver amplificação. No total, 50 amostras foram sequenciadas, 49 não apresentaram mutação e em uma amostra foi identificada a mutação Leu208Pro. O gene analisado apresentou baixa frequência de mutação na amostra analisada. A mutação Leu208Pro não está descrita na literatura, portanto não se pode confirmar a sua relação com a RAM em hanseníase. Faz-se necessário novos estudos para melhor compreensão da frequência de mutações e da correlação desse gene com a RAM em hanseníase.

Palavras Chave

Hanseníase; Resistência aos antimicrobianos; vigilância molecular