Dados do Trabalho

Título

Avaliar a viabilidade de isolados filamentosos mantidos em óleo mineral, com período de manutenção entre 19 e 46 anos, da coleção de culturas Prof Carlos da Silva Lacaz, do Instituto de Medicina Tropical, Faculdade de Medicina da Universidade de Sã

Introdução

Fungos podem ser patogênicos em humanos e resultar em alta morbidade e mortalidade, e impactar a saúde humana. Diante disso a preservação de culturas torna-se relevante para estudos, entretanto devem garantir a viabilidade, estabilidade e pureza do microrganismo por períodos prolongados, além da estabilidade fenotípica, fisiológica, genética e patogênica.

Objetivo (s)

Avaliar a viabilidade de fungos filamentosos hialinos e melanizados de interesse Médico, pertencentes a Coleção do IMT-FMUSP mantidos em óleo mineral a longo prazo.

Material e Métodos

Selecionamos inicialmente 63 isolados preservados em óleo mineral entre 19 e 46 anos. Dezessete  foram excluídos por ausência de dados, permanecendo 67,4% (n=31) entre 19-20 anos, 17,4% (n=8) entre 26-23 anos, e 15,2% (n=7) entre 46-43 anos de preservação. Avaliamos a viabilidade em diferentes meios de cultura (Batata, Sabouraud-dextrose e Aveia), além da realizarmos a identificação fenotípica, por metodologia clássica e molecular.

Resultados e Conclusão

O ágar Sabouraud apresentou melhor viabilidade, enquanto ágar Batata e ágar Aveia apresentaram melhor conidiogênese em fungos melanizados, exceto para o fungo Chaetomium globosum em que ágar Sabouraud-dextrose permitiu maior viabilidade ou conidiogênse?. Alguns isolados com período de preservação entre 19-20 anos foram mantidos por repiques sucessivos até a manutenção em óleo mineral, desta forma diminuindo a viabilidade e resultando em 51,6% de isolados viáveis: 10 de agentes de micose oportunista e seis agentes de cromomicose; os preservados entre 26-23 anos foram viáveis: três de agentes de micose oportunista e três de eumicetoma e um de cromomicose; enquanto para  entre 46-43 anos foram viáveis dois agentes de micoses superficiais, um agente de cromomicose e um agente de eumicetoma. O sequenciamento dos isolados evidenciou concordância da maioria dos gêneros, sendo que alguns com a taxonomia atualizada. Essa metodologia apresentou baixa viabilidade para fungos da ordem Mucorales. Concluímos que a metodologia de preservação é eficaz para fungos filamentosos e hialinos, exceto os da Ordem Mucorales e fungos melanizados. Observamos que quanto maior o tempo entre o isolamento e a preservação em Óleo Mineral menor a viabilidade dos isolados.

Palavras Chave

Fungos filamentosos; Métodos de preservação; Viabilidade; Coleção de Culturas