Dados do Trabalho

Título

Identificação da circulação do vírus Oropouche no estado de Minas Gerais

Introdução

A febre oropouche é causada pelo arbovírus Oropouche (OROV). Dada a semelhança dos sintomas com outros vírus como da dengue e chikungunya que são endêmicos de MG, além da capacidade que esses vírus possuem de se disseminar para novas regiões, é essencial a inclusão de testes de diagnóstico molecular específicos para OROV na rotina laboratorial, a fim de garantir um diagnóstico preciso, permitindo respostas rápidas e adequadas em termos de saúde pública.  

Objetivo (s)

 Identificar a possível presença e circulação dos vírus Oropouche no estado de MG através de testes moleculares em amostras de pacientes suspeitos de arboviroses enviadas ao Lacen MG.  

Material e Métodos

As amostras utilizadas neste estudo foram coletadas como parte da rotina de diagnóstico e vigilância epidemiológica da dengue e chikungunya no estado de Minas Gerais. Foram testadas 1.027 amostras, incluindo aquelas que apresentaram resultado detectável e não detectável, no período de fevereiro a maio de 2024 utilizando a técnica de RT-qPCR. A extração de RNA viral das amostras foi conduzida empregando um protocolo automatizado na plataforma MagNA Pure 96 (Roche), utilizando o kit MagNA Pure 96 DNA and Viral NA Small Volume (Roche), seguindo as recomendações do fabricante. Em seguida, foi realizado o RT-qPCR multiplex no termociclador 7500 Real-Time PCR (Thermo), utilizando dois ensaios moleculares: o Kit Molecular IBMP e o ensaio in-house  adaptado de Naveca, 2017 et al .    Sequenciamento do genoma Para confirmação do vírus e estabelecimento das linhagens circulantes no estado foi realizado o sequenciamento genético de dois  genomas completos utilizando a abordagem overlapping primers no equipamento MinIon (Oxford Nanopore). O cDNA foi sintetizado utilizando a enzima SuperScript IV (Thermo) e posteriormente realizado o PCR com a enzima Q5 (NEB) seguindo as recomendações dos fabricantes. A montagem do genoma e a identificação do vírus se deu através do programa Genome Detective (www.genomedetective.com).  

Resultados e Conclusão

Das amostras testadas, 74 apresentaram resultado detectável para OROV, sendo importante observar que todas foram coletadas no mês de abril de 2024. As sequências geradas se agrupam com outras amostras que estão circulando no Brasil. Os resultados, com uma positividade de 7%, demonstram a importância de implementar um diagnóstico diferencial específico para as arboviroses.  

Palavras Chave

Oropouche; diagnóstico molecular; sequenciamento; Epidemiologia