Dados do Trabalho

Título

Caracterização de N-acetilgalactosamina em Trichophoromyia spp. e interação in vitro com Leishmania (Viannia) lainsoni

Introdução

A caracterização de glicoconjugados intestinais de flebotomíneos e o entendimento de sua interação com espécies de Leishmania é fundamental para o avanço do conhecimento sobre competência vetorial. Espécies de Trichophoromyia têm sido associadas à transmissão de L. (Viannia) lainsoni com base em evidências de campo, desse modo requerendo estudos experimentais para maior embasamento.

Objetivo (s)

O trabalho objetivou investigar a presença de N-acetilgalactosamina (GalNac) no epitélio intestinal de Trichophoromyia ubiquitalis e Th. brachipyga e avaliar a interação in vitro com L. (V.) lainsoni.

Material e Métodos

Fêmeas de Th. ubiquitalis e Th. brachipyga capturadas em um parque urbano de Belém, foram utilizadas; Lutzomyia longipalpis colonizadas em laboratório foram incluídas como controle. Os espécimes foram individualmente dissecados para os experimentos propostos. Para a investigação da presença de GalNac, intestinos foram lisados e submetidos a western blotting, utilizando lectina HPA conjugada com peroxidase. A intensidade das bandas geradas foi estimada com o software ImageJ. Para a interação in vitro, intestinos foram abertos longitudinalmente para expor o lúmen e incubados com 10^7 promastigotas/mL em fase estacionária. Experimentos foram conduzidos separadamente entre cada espécie de flebotomíneo e os parasitos Leishmania (V.) lainsoni e Leishmania (L.) infantum chagasi. Os resultados foram analisados em microscopia óptica.  

Resultados e Conclusão

Foi detectada a presença de glicoconjugados contendo GalNac no epitélio intestinal de ambas as espécies de Trichophoromyia investigadas. Th. ubiquitalis apresentou reatividade mais intensa, com bandas variando entre 75 kDa a 150 kDa, enquanto Th.brachipyga apresentou menor reatividade e banda de 100 kDa. Em Lu. longipalpis, foi detectado bandas variando entre 50 kDa a 150 kDa. Foram realizadas 45 interações entre os binômios Th. ubiquitalis / L. (V.) lainsoni (n=10) Th. brachipyga / L. (V.) lainsoni (n=15) e Lu. longipalpis / L. (L.) infantum chagasi (n=20). Os resultados, com respectivas porcentagens de adesão (fraco, moderado, forte) são descritas a seguir: Th. ubiquitalis / L. (V.) lainsoni (10%, 60%, 30%), Th. brachipyga / L. (V.) lainsoni (13%, 60%, 27%), Lu. longipalpis / L. (L.) infantum chagasi (10%, 35%, 55%). Os resultados sugerem a permissividade/susceptibilidade entre espécies de Trichophoromyia e promastigotas de L. (V.) lainsoni, fornecendo evidências sobre a competência vetorial desses flebotomíneos e o provável sítio de adesão para o parasito.

Palavras Chave

N-acetilgalactosamina; Trichophoromyia spp.; Leishmania spp.; Interação in vitro