Dados do Trabalho

Título

Frequência de mutações no gene fadD9 do Mycobacterium leprae em pacientes atendidos em uma fundação de referência no Amazonas

Introdução

A hanseníase, doença infecciosa crônica causada pelo Mycobacterium leprae e Mycobacterium lepromatosis, passou a utilizar tratamento com antimicrobianos na década de 40 e foi seguido por relatos de resistência aos antimicrobianos (RAM) em anos posteriores. O tratamento irregular, por longos períodos e em monoterapia favoreceram o surgimento de mutações associadas à RAM. Para redizir o surgimento da RAM foi adotado o esquema de poliquimioterapia, vigente até os dias atuais. O monitoramento da RAM em hanseníase no Brasil ocorre de forma sistemática desde outubro de 2018. Os dados demonstram baixa frequência de mutações nos genes avaliados: folpI (dapsona), rpoB (rifampicina) e gyrA (ofloxacino). Contudo, a busca por novos alvos e mecanismos associados com a RAM é fundamental para o sucesso do tratamento. Estudos recentes sugerem a participação de outros genes na RAM, dentre eles o gene fadD9. Pouca informação sobre esse gene está disponível, mas é provável que ele codifique uma enzima do tipo CoA-ligase, que participa da oxidação de ácidos graxos. Sua ligação com a RAM ainda necessita de confirmação, especialmente sua relação com a clofazimina.

Objetivo (s)

Investigar a frequência de mutações no gene fadD9 do M. leprae em pacientes com recidiva, atendidos em uma fundação de referência em dermatologia no Amazonas.

Material e Métodos

Foram incluídas 83 amostras de biopsias de pacientes com recidiva, coletadas no período de 2012-2018, para investigação da RAM na Fundação Hospitalar Alfredo da Matta. O DNA extraído foi amplificado por PCR convencional e seguido de sequenciamento direto, pelo método Sanger. As sequências obtidas foram analisadas com o Software Mega, Versão 11. Este estudo foi aprovado pelo CEP/FUHAM (parecer 2.081.853).

Resultados e Conclusão

Dos 83 casos de recidiva, 10 não apresentaram amplificação do DNA alvo, impossibilitando a análise. Em 73 amostras os produtos de pcr foram sequenciados. Foram observadas 8 (11%) amostras com mutações no gene fadD9. A mutação mais frequente (N=3) foi a T65, do tipo silenciosa. Também foram observadas outras três mutações A162 (N=1), I178 (N=1) e T795 (N=1) desse tipo. Duas mutações de sentido trocado foram observadas, D520N e G267S. Conclusão: O gene analisado apresentou elevada frequência de mutação na amostra analisada, comparado aos demais genes avaliados na rotina de RAM. Isso reforça a necessidade de estudos voltados para melhor compreensão do seu papel na RAM em hanseníase.

Palavras Chave

Resistência aos antimicrobianos; vigilância molecular; Hanseníase.