Dados do Trabalho

Título

SUSCETIBILIDADE A ANTIFÚNGICOS DE ESPÉCIES DE Trichophyton sp. POR ESPECTROSCOPIA NO INFRAVERMELHO COM TRANSFORMADA DE FOURIER

Introdução

O gênero Trychophyton é o principal fungo causador de dermatofitoses. Entre as terapias antifúngicas por via oral, terbinafina, itraconazol e fluconazol são os mais utilizados. Os testes de suscetibilidade auxiliam na escolha do fármaco mais adequado, mas demandam mão de obra qualificada, são demorados e apresentam alto custo. Assim, tem emergido a utilização de novas tecnologias limpas e acessíveis para a determinação do perfil de susceptibilidade de microrganismos. Dentre elas, destaca-se a Espectroscopia no Infravermelho com Transformada de Fourier (FTIR), técnica baseada na identificação de vibrações moleculares que quando associada a quimiometria, torna-se uma ferramenta útil na área da saúde.

Objetivo (s)

O objetivo do trabalho foi desenvolver modelos de perfil de suscetibilidade de espécies de Trichophyton por FTIR. 

Material e Métodos

Este projeto iniciou após a aprovação do Comitê de Ética da Univates (CAAE: 26883019.2.0000.5310). Foram utilizados 44 isolados clínicos mantidos em micoteca, os quais foram identificados previamente por sequenciamento do DNA em: Trichophyton interdigitale (24), Trichophyton rubrum (18) e Trichophyton tonsurans (2). Para determinação da concentração inibitória mínima (CIM) frente aos antifúngicos foi utilizado o protocolo M38-A2 do Clinical and Laboratory Standard Institute e foram classificadas em wild-type (WT) e non-wild-type (NWT). Os espectros de FTIR foram adquiridos por Reflexão Total Atenuada (ATR) e a análise multivariada quantitativa foi realizada via regressão por Mínimos Quadrados Parciais com Correção de Sinal Ortogonal (OPLS). 

Resultados e Conclusão

As CIMs de terbinafina variaram entre 0,00195 e 2 µg/mL (um isolado classificado como NWT); itraconazol, 0,0312 e 64 µg/mL (11,4% NWT); e fluconazol, 0,125 a 64 µg/mL (22,6% NWT). Foram evidenciadas regiões de discriminações de cepas WT e NWT relacionadas a: proteínas e presença de triacilglicerois (itraconazol); polissacaríeos (fluconazol); e área sob a curva (terbinafina). Para determinação de CIM por ATR /OPLS, a conversão dos CIMs para ln2 foi necessária para obter erros de predição iguais ou inferior a 0,58% para os três antifúngicos, permitindo a quantificação correta em toda a faixa de valores de CIM avaliados. Desta forma, os três modelos propostos de ATR/OPLS-ln2CIM para quantificações de CIMs de terbinafina, itraconazol e fluconazol para Trichophyton sp. apresentaram 100% de sensibilidade e especificidade, podendo ser úteis em laboratórios de análises clínicas.

Palavras Chave

Reflexão Total Atenuada; OPLS; concentração inibitória mínima