Dados do Trabalho

Título

Desenvolvimento de teste imunocromatográfico de fluxo lateral utilizando proteína quimérica QTc1 para sorodiagnóstico da doença de Chagas.

Introdução

A doença de Chagas (DCh) é uma doença negligenciada e endêmica causada pelo Trypanosoma cruzi. Apenas 10% dos portadores desta condição tem acesso ao diagnóstico e tratamento específicos. A utilização de extratos antigênicos ou antígenos brutos no sorodiagnóstico interferem com sua especificidade. Por outro lado, um único antígeno recombinante pode não alcançar alta sensibilidade, dada a diversidade antigênica das linhagens de T. cruzi. Assim, o uso de proteínas recombinantes quiméricas pode melhorar a acurácia do sorodiagnóstico, ferramenta essencial entre as estratégias de controle e prevenção desta doença. Como alternativa, o teste de diagnóstico rápido (RDT) possibilita uma triagem em larga escala e o acesso da população mais vulnerável ao diagnóstico.

Objetivo (s)

Neste contexto, o objetivo deste trabalho foi prototipar um RDT e realizar a prova de conceito para o uso da QTc1 como antígeno para detecção de anticorpos em soros de pacientes suspeitos para DCh.

Material e Métodos

A QTc1 foi produzida em sistema procarioto e purificada da fração solúvel do extrato bacteriano. Posteriormente, foi aplicada e avaliada na plataforma de ELISA, obtendo uma sensibilidade de 94% (IC95% 88-97) e especificidade 97% (IC95% 92-99), quando testada com soros individuais positivos (n=133) e negativos (n=114) - CAAE: 02279618.0.0000.5146, parecer: 5.467.411. O RDT proposto tem um formato de fluxo lateral para a detecção de anticorpos IgG anti-T. cruzi em amostras de soro ou plasma, composto por uma linha teste com anticorpos anti-IgG humana imobilizados na membrana de nitrocelulose e a QTc1 conjugada às partículas de ouro coloidal, que é capturada na linha teste. Foram utilizadas oito amostras de soro de indivíduos positivos para a infecção, previamente caracterizadas em teste ELISA, hemaglutinação indireta e imunofluorescência indireta, e 21 amostras de soro de indivíduos sabidamente negativos.

Resultados e Conclusão

Como resultados desta prova de conceito, o teste apresentou sensibilidade de 100%, com boa performance na corrida e na intensidade de sinal. Por outro lado, apresentou resultados falso-positivos para duas das 21 amostras testadas. Apesar da redução da especificidade, o resultado demonstra que a utilização da QTc1 como antígeno no RDT é promissora como ferramenta no sorodiagnóstico para DCh e elegível para padronização de protótipo a ser validado com maior número de amostras, de diferentes regiões e formas clínicas da DCh, após a realização de ajustes para otimização.

Palavras Chave

Sorodiagnóstico; Doença de Chagas; antígeno quimérico; teste imunocromatográfico de fluxo lateral; teste rápido imunocromatográfico.