Dados do Trabalho

Título

PROSPECÇÃO DE NOVOS COMPOSTOS DE COODERNAÇÃO CONTRA ISOLADOS CLÍNICOS DE Cryptococcus neoformans e Cryptococcus gattii

Introdução

Em 2022, a OMS compilou uma lista classificando e categorizando patógenos fúngicos em três grupos de prioridade, com Cryptococcus neoformans liderando o grupo de prioridade crítica. A terapia antifúngica para o tratamento da criptococose é limitada, com apenas três classes de antifúngicos disponíveis atualmente: poliênos, flucitosina e azóis.

Objetivo (s)

Nesse contexto, nosso objetivo foi investigar a ação de novos compostos de coordenação contra 6 isolados clínicos de Cryptococcus: 3 isolados de C. gattii e 3 isolados de C. neoformans.

Material e Métodos

Os isolados foram cultivados em meio Sabouraud a 37ºC. Inicialmente, conduzimos uma triagem de 53 compostos de coordenação usando a metodologia clássica de antifungigrama em meio Mueller-Hinton a 37°C realizada seguindo CLSI M27-A3. A concentração inibitória mínima (CIM) foi realizada seguindo CLSI M27-A3 e a concentração fungicida mínima (CFM) por contagem de unidades formadoras de colônias (UFCs) após plaqueamento em meio Sabouraud. Avaliamos a atividade metabólica mitocondrial pelo método de redução do XTT após o tratamento das cepas fúngicas. Avaliamos a atividade hemolítica dos compostos, após 3 horas de incubação com eritrócitos de carneiro bem como a toxicidade dos compostos em larvas de Galleria melonella.

Resultados e Conclusão

Os resultados evidenciaram que os compostos que apresentaram o melhor desempenho antifúngico foram CuαHBPA e CuβHBPA, onde as CIM e CFM variaram de 25 μM a 100 μM, os quais foram selecionados para investigar seus possíveis mecanismos de ação sobre as células de Cryptococcus. Observamos que a concentração de 2×MIC dos compostos selecionados foi suficiente para inibir a atividade metabólica mitocondrial em todas as cepas. Ambos os compostos de coordenação não apresentaram atividade hemolítica in vitro até a concentração de 125 µM. Os compostos de coordenação também não apresentaram toxicidade em larvas de G. mellonella inoculadas com 62,5 µM até 500 µM, apresentando 100% de sobrevivência após 7 dias. Os resultados obtidos demonstram que esses compostos de coordenação exibiram promissoras atividades contra Cryptococcus spp. Nossos próximos passos visam continuar investigando os diferentes mecanismos de ação desses compostos, incluindo avaliar da integridade da membrana celular por meio da marcação com iodeto de propídeo, avaliar a ação dos compostos no tratamento de larvas infectadas e avaliar os níveis de estresse oxidativo.

Palavras Chave

Cryptococcus; Compostos de coordenação; Galleria mellonella