Dados do Trabalho

Título

PROSPECÇÃO DE NOVOS COMPOSTOS DE COODERNAÇÃO CONTRA ISOLADOS CLÍNICOS DE Cryptococcus neoformans e Cryptococcus gattii

Introdução

<p>Em 2022, a OMS compilou uma lista classificando e categorizando patógenos fúngicos em três grupos de prioridade, com <em>Cryptococcus neoformans</em> liderando o grupo de prioridade crítica. A terapia antifúngica para o tratamento da criptococose é limitada, com apenas três classes de antifúngicos disponíveis atualmente: poliênos, flucitosina e azóis.</p>

Objetivo (s)

<p>Nesse contexto, nosso objetivo foi investigar a ação de novos compostos de coordenação contra 6 isolados clínicos de <em>Cryptococcus</em>: 3 isolados de <em>C. gattii</em> e 3 isolados de <em>C. neoformans.</em></p>

Material e Métodos

<p>Os isolados foram cultivados em meio Sabouraud a 37ºC. Inicialmente, conduzimos uma triagem de 53 compostos de coordenação usando a metodologia clássica de antifungigrama em meio Mueller-Hinton a 37°C realizada seguindo CLSI M27-A3. A concentração inibitória mínima (CIM) foi realizada seguindo CLSI&nbsp;M27-A3 e a concentração fungicida mínima (CFM) por contagem de unidades formadoras de colônias (UFCs) após plaqueamento em meio Sabouraud. Avaliamos a atividade metabólica mitocondrial pelo método de redução do XTT após o tratamento das cepas fúngicas. Avaliamos a atividade hemolítica dos compostos, após 3 horas de incubação com eritrócitos de carneiro bem como a toxicidade dos compostos em larvas de <em>Galleria melonella</em>.</p>

Resultados e Conclusão

<p>Os resultados evidenciaram que os compostos que apresentaram o melhor desempenho antifúngico foram CuαHBPA e CuβHBPA, onde as CIM e CFM variaram de 25 μM a 100 μM, os quais foram selecionados para investigar seus possíveis mecanismos de ação sobre as células de <em>Cryptococcus</em>. Observamos que a concentração de 2×MIC dos compostos selecionados foi suficiente para inibir a atividade metabólica mitocondrial em todas as cepas. Ambos os compostos de coordenação não apresentaram atividade hemolítica <em>in vitro</em> até a concentração de 125 µM. Os compostos de coordenação também não apresentaram toxicidade em larvas de <em>G. mellonella</em> inoculadas com 62,5 µM até 500 µM, apresentando 100% de sobrevivência após 7 dias. Os resultados obtidos demonstram que esses compostos de coordenação exibiram promissoras atividades contra <em>Cryptococcus</em> spp. Nossos próximos passos visam continuar investigando os diferentes mecanismos de ação desses compostos, incluindo avaliar da integridade da membrana celular por meio da marcação com iodeto de propídeo, avaliar a ação dos compostos no tratamento de larvas infectadas e avaliar os níveis de estresse oxidativo.</p>

Palavras Chave

Cryptococcus; Compostos de coordenação; Galleria mellonella