Dados do Trabalho

Título

Avaliação da Expressão de Citocinas Pró-Inflamatórias após interação celular com isolados Clínicos de Shigella

Introdução

A Shigella é um patógeno associado a doenças diarreicas, sendo suas espécies classificadas de acordo com a estrutura do antígeno O. A doença envolve uma séria de citocinas que contribuem com processo inflamatório e modulam a resposta do hospedeiro. Devido ao aumento alarmante nas taxas de mortalidade e morbidade associadas a esse patógeno, ele agora é considerado prioridade de saúde pela OMS. A crescente resistência aos antimicrobianos ampliou ainda mais o desafio no tratamento de pacientes, resultando em internações prolongadas em hospitais.

Objetivo (s)

Avaliar o potencial inflamatório dos isolados clínicos de Shigella flexneri 201 (SF201) e Shigella boydii 183 (SB183) em células de macrófago, derivado de sarcoma do retículo de camundongo da linhagem BALB/c (J774).

Material e Métodos

Os isolados clínicos foram coletados de crianças com diarreia atendidas em hospitais de Manaus. Estes experimentos envolveram a aplicação dos isolados em células epiteliais humanas do tipo 2 (HEp-2) para teste de invasão celular e J774 para análise de fagocitose. O estudo também inclui etapas de extração de RNA, transcrição em cDNA e análise de expressão gênica em tempo real para identificar as citocinas expressas nos intervalos de 30 a 180 minutos.

Resultados e Conclusão

Os resultados dos testes de invasão celular com HEp-2 mostraram uma evolução nos padrões de invasão dos isolados clínicos, destacando-se o SF201, devido à sua taxa de internalização bacteriana nas células, que está em concordância com o perfil da cepa de referência de Shigella M90T. Já no teste de fagocitose com J774, constatou-se uma redução da quantidade de células à medida que o tempo de exposição aumentava. Em relação a expressão gênica, a citocina pró-inflamatória IL-1β apresentou alta taxa de expressão nos tempos de 30 e 120 minutos nos isolados clínicos, enquanto houve baixa regulação em SB183 e na cepa de referência de Escherichia coli enteroinvasora (EIEC), indicando uma interação mais lenta com J774. A expressão de TNF-α, revelou que a EIEC e SB183 se assemelhavam a M90T, demonstrando potencial para induzir o processo de necrose em J774. A análise mostrou que SB183 exibiu padrões de invasão mais lentos e infecção menos grave em comparação com a EIEC. Por outro lado, SF201 demonstrou uma propensão para manipulação específica de J774 em pontos específicos da infecção. Esses resultados ressaltam a necessidade de investigações continuadas para elucidar as discrepâncias na manipulação do hospedeiro e os fatores de virulência envolvidos no processo infeccioso.

Palavras Chave

Isolados línicos; invasão celular; citocinas inflamatórias; Amazônia.