Dados do Trabalho

Título

Análise morfológica e molecular do co-cultivo de Blastocrithidia triatomae e outros tripanossomatideos de triatomíneos

Introdução

Tripanossomatídeos são microeucariotos parasitas que infectam insetos, vertebrados e plantas, tendo importância médica, veterinária e agrícola. Algumas espécies são causadoras de doenças endêmicas no Brasil, como a Doença de Chagas, cujo agente etiológico é o Trypanosoma cruzi, que possui triatomíneos como vetores. Trypanosoma rangeli, Trypanosoma conorhini e Blastocrithidia triatomae podem compartilhar com T. cruzi os mesmos hospedeiros/vetores e por vezes em infecções mistas. No entanto, pouco se sabe sobre a dinâmica dessas interações.

Objetivo (s)

O objetivo é avaliar o destino de B. triatomae após co-cultivos experimentais com T. cruzi, T. rangeli e T. conorhini.

Material e Métodos

Os parasitos foram cultivados em meio MBT (favorável ao crescimento de B. triatomae e outras espécies) e, aos 7 dias de cultivo, misturados em combinações: B. triatomae (amostra original)+ T. cruzi (clone CL-Brener), B. triatomae + T. rangeli (cepa Macias) e B. triatomae + T. conorhini (cepa Deane) e em proporções diferentes de cada espécie (50-50%, 5-95%, 95-5%, 25-75%, 75-25%). Foi feito PCR convencional para amplificação dos genes comumente utilizados na identificação de tripanossomatídeos 121/122, Bt52f/Bt647R, D71/D72 e Tr/ME aos 10º, 20º e 30º dias para todas as amostras. Em caso da detecção de pelo menos duas espécies foi feita qPCR para a quantificação dos parasitos. Análise do crescimento e a diferenciação celular in vitro (esfregaços corados pelo Giemsa) das espécies e das misturas foram avaliados até o 30º dia de cultivo.

Resultados e Conclusão

Resultados preliminares indicam possibilidade de seleção de B. triatomae por T. rangeli em algumas proporções realizadas; o predomínio de T. cruzi nos co-cultivos com esta espécie; e a presença das duas espécies quando B. triatomae foi misturada com T. conorhini, independente da proporção inicial de células utilizadas para a co-manutenção.

Palavras Chave

Blastocrithidia triatomae; Trypanosoma spp; PCR; morfologia; co-cultivo