Dados do Trabalho

Título

Análise morfológica e molecular do co-cultivo de Blastocrithidia triatomae e outros tripanossomatideos de triatomíneos

Introdução

<p>Tripanossomatídeos são microeucariotos parasitas que infectam insetos, vertebrados e plantas, tendo importância médica, veterinária e agrícola. Algumas espécies são causadoras de doenças endêmicas no Brasil, como a Doença de Chagas, cujo agente etiológico é o <em>Trypanosoma cruzi</em>, que possui triatomíneos como vetores. <em>Trypanosoma rangeli</em>,<em> Trypanosoma conorhini</em> e Blastocrithidia triatomae podem compartilhar com <em>T. cruzi</em> os mesmos hospedeiros/vetores e por vezes em infecções mistas. No entanto, pouco se sabe sobre a dinâmica dessas interações.</p>

Objetivo (s)

<p>O objetivo é avaliar o destino de <em>B. triatomae </em>após co-cultivos experimentais com <em>T. cruzi</em>, <em>T. rangeli </em>e <em>T. conorhini</em>.</p>

Material e Métodos

<p>Os parasitos foram cultivados em meio MBT (favorável ao crescimento de <em>B. triatomae</em> e outras espécies) e, aos 7 dias de cultivo, misturados em combinações: <em>B. triatomae</em> (amostra original)+ <em>T. cruzi</em> (clone CL-Brener), <em>B. triatomae</em> + <em>T. rangeli</em> (cepa Macias) e <em>B. triatomae</em> + <em>T. conorhini</em> (cepa Deane) e em proporções diferentes de cada espécie (50-50%, 5-95%, 95-5%, 25-75%, 75-25%). Foi feito PCR convencional para amplificação dos genes comumente utilizados na identificação de tripanossomatídeos 121/122, Bt52f/Bt647R, D71/D72 e Tr/ME aos 10º, 20º e 30º dias para todas as amostras. Em caso da detecção de pelo menos duas espécies foi feita qPCR para a quantificação dos parasitos. Análise do crescimento e a diferenciação celular in vitro (esfregaços corados pelo Giemsa) das espécies e das misturas foram avaliados até o 30º dia de cultivo.</p>

Resultados e Conclusão

<p>Resultados preliminares indicam possibilidade de seleção de <em>B. triatomae</em> por <em>T. rangeli</em> em algumas proporções realizadas; o predomínio de <em>T. cruzi</em> nos co-cultivos com esta espécie; e a presença das duas espécies quando <em>B. triatomae</em> foi misturada com <em>T. conorhini</em>, independente da proporção inicial de células utilizadas para a co-manutenção.</p>

Palavras Chave

Blastocrithidia triatomae; Trypanosoma spp; PCR; morfologia; co-cultivo