Dados do Trabalho

Título

AVALIAÇÃO IN SILICO E IN VITRO DA ATIVIDADE ANTI-Leishmania infantum DE UM DERIVADO DE CICLOHEXIL-1,2,4-OXADIAZOL

Introdução

Há mais de 12 milhões de pessoas infectadas com a leishmaniose. Como complicador, é uma doença negligenciada, uma vez que os países acometidos são subdesenvolvidos e os tratamentos disponíveis são antigos, tóxicos, necessitando de um longo período de administração parenteral e com eficiência limitada. O anel heterocíclico oxadiazol tem diversas atividades biológicas, incluindo atividade leishmanicida já demonstrada pelo nosso grupo, tornando esses compostos candidatos a fármacos. 

Objetivo (s)

O objetivo do trabalho foi avaliar a atividade leishmanicida in vitro de um composto oxadiazólico (2i) tentando traçar um mecanismo de ação por inibição enzimática e acoplamento molecular. 

Material e Métodos

Para realização da análise de acoplamento molecular do (2i) na enzima acetilcolinesterase (AChE) foi utilizado o software Autodock versão 1.5.7; como controle positivo foi utilizada a fisostigmina. Para avaliação da atividade enzimática da AChE frente ao oxadizol (2i) foi possível obter a porcentagem de inibição através da velocidade de reação das amostras em relação ao branco. A atividade leishmanicida do (2i) foi avaliada em promastigotas de L. Infantum (Ba262), em diferentes concentrações (7,8 a 1000 μM), mensurada através da contagem direta em três triplicatas, obtendo-se a IC50. Para avaliação da citotoxicidade e obtenção da viabilidade celular (CC50), macrófagos murinos RAW 264.7 foram empregados frente a diferentes concentrações do (2i) (7,8 a 1000 μM), aplicando-se o método colorimétrico MTT em três triplicatas. Foi obtido o índice de seletividade (IS), através do cálculo CC50/IC50.

Resultados e Conclusão

Nas simulações de acoplamento molecular no sítio ativo da enzima AChE, a molécula (2i) apresentou valores de energia de ligação superiores a da fisostigmina (-7.39 kcal/mol vs. -6.66 kcal/mol), respectivamente, entretanto no mapa farmacotrópico foi possível verificar que a fisostigmina possui mais interações moleculares que a (2i). Nos ensaios de inibição da AChE, a (2i) apresentou IC50 de 11,91 µg/mL, sugerindo comprometimento da membrana parasitária como um potencial mecanismo de ação a ser estudado. Por fim, a molécula estudada (2i) apresentou atividade leishmanicida relevante em L. infantum com IC50 = 30,86 μM. Com o teste de citotoxicidade em macrófagos RAW 264.7 pode-se constatar baixa toxicidade com CC50 = 485,5 µM e IS = 17,86. Logo, a (2i) torna-se promissora para mais estudos, abrindo perspectivas para agentes antileishmaniais mais baratos e seletivos, apresentando menor toxicidade.

Palavras Chave

Oxadiazol; Leishmanioses; Inibidores da colinesterase; Citotoxicidade