Dados do Trabalho

Título

Reatividade gênero específica no imunodiagnóstico de Paracoccidioides spp.

Introdução

A paracoccidioidomicose (PCM) é micose sistêmica causada por fungos do gênero Paracoccidioides. A micose apresenta alta endemicidade na América do Sul com aproximadamente 80% dos casos descritos registrados no Brasil.  O diagnóstico definitivo da PCM baseia-se na observação direta de leveduras com múltiplos brotamentos em fluídos corporais ou tecidos bem como pela cultura do agente etiológico seguido da reversão da fase miceliar para leveduriforme. Entretanto, os métodos clássicos de diagnóstico baseados nas características fenotípicas e na cultura do patógeno são demorados e pouco sensíveis; e a avaliação histopatológica pode ser inviável para alguns pacientes, pelo risco durante o procedimento de coleta do espécime ou ainda pela inacessibilidade ao local da lesão.  Desta forma, o diagnóstico sorológico tornou-se uma importante ferramenta tanto de diagnóstico quanto de seguimento da doença.

Objetivo (s)

Avaliar por imunodifusão dupla e immunoblotting, a antigenicidade de antígenos de Paracoccidioides brasiliensis sensu strictu (S1) e P. lutzii. 

Material e Métodos

Avaliou-se 45 amostras de soro de pacientes com PCM comprovada  e residentes nos estados de Rondônia (n=21) e de São Paulo (n=24); 20 amostras de soro de pacientes com confirmação sorológica de histoplasmose (10) e aspergilose (10) e 9 amostras de doadores de banco de sangue. Três isolados de P. lutzii (01, 66 e 8334) e um isolado de P. brasiliensis (113) foram cultivados a 37ºC, em ágar Fava-Netto modificado. Os antígenos de P. lutzii foram obtidos após 5, 10 e 20 dias de cultivo e o de P. brasiliensis após 10 dias. A  pesquisa de anticorpos circulantes foi realizada por  imunodifusão dupla em gel de agarose e immunoblotting.

Resultados e Conclusão

As amostras de soro dos pacientes residentes nos estados de Rondônia e de São Paulo, apresentaram reatividade cruzada “gênero especifica” frente aos antígenos de P. lutzii e de P. brasiliensis. Por immunoblotting, comprovou-se a ocorrência de reatividade cruzada entre as espécies de Paracoccidioides spp., já que diversas amostras de soro reconheceram tanto os marcadores sorológicos da infecção por P. brasiliensis (gp43 e gp70), assim como diversas frações de P. lutzii, com destaque a fração de 60 kDa. Por SDS-PAGE, confirmou-se o compartilhamento de componentes antigênicos entre ambas as espécies, justificando assim, a ocorrência de reatividade cruzada "gênero específica". Conclui-se, portanto, a impossibilidade de discriminar, sorologicamente PCM causada por P. brasiliensis daquela causada por P. lutzii.

Palavras Chave

paracoccidioidomicose; imunodiagnóstico; P. lutzii; antígenos