Dados do Trabalho

Título

Vesículas extracelulares secretadas por Leishmania (Leishmania) infantum são potenciais biomarcadores para uso no diagnóstico sorológico da leishmaniose visceral

Introdução

No Brasil, a leishmaniose visceral (LV), causada por Leishmania (Leishmania) infantum, tem alta letalidade em humanos e cães domésticos. Estudos têm mostrado diversas funções das vesículas extracelulares (EVs), e muitas delas são relacionadas com resposta imunológica. A relação da EVs liberadas por L. (L.) infantum (Leish-EVs) e hospedeiros não está esclarecida.

Objetivo (s)

Este estudo avaliou a capacidade das Leish-EVs liberadas por promastigotas de L. (L.) infantum de ser marcador para o diagnóstico sorológico da LV em humanos (Hum LV) e em cães (Can LV). 

Material e Métodos

Foram testados 297 soros (153 humanos e 144 caninos). Os humanos foram divididos em 5 grupos. 1. Hum LV, 67 soros de pacientes com LV; 2. CN-H, 26 soros de indivíduos saudáveis; 3. TX, 27 soros de indivíduos com toxoplasmose assintomática; 4. DCA, 13 soros de pacientes com doença de Chagas assintomática; e 5. DCS, 20 soros de pacientes com doença de Chagas grave. Os caninos foram divididos em 3 grupos. 1. Can LV, 62 soros de cães com Can LV; 2. CN-AE/CN-ANE, 60 soros de cães sem Can LV. Este grupo consistiu de 24 soros de cães de áreas endêmicas (CN-AE) e 36, de cães de áreas não endêmicas (CN-ANE); e 3. OI, 22 soros de cães com outras infecções (toxoplasmose; erliquiose; leptospirose e febre maculosa)

Resultados e Conclusão

Os resultados foram apresentados em absorbância e controles negativos foram utilizados para os cálculos da especificidade e “Cut-off”. As comparações entre os grupos foram calculadas pelo teste não pareado bicaudal e as diferenças estatisticamente significativas a p ≤ 0,05. As curvas ROC foram construídas para comparar os grupos Hum LV x CN-H (soros humanos); e CanVL x CN-AE/CN-ANE (soros caninos). Nos pacientes Hum LV, 62 dos 67 foram reativos (sensibilidade de 93,05%). Os 26 soros do grupo CN-H foram negativos (especificidade de 100%). Os 27 soros do grupo TX foram negativos. O grupo DCA apresentou 54% (7/13) e DCS, 75% de reatividade cruzada (15/20). Hum LV foi estatisticamente diferente dos grupos CN-H e TX em p<0,0001 e CDA a p=0,0064. Nos cães com Can LV, 59 dos 62 foram reativos (sensibilidade de 95,40%). Especificidade foi 96,61%, pois o grupo CN-C/AE teve 3 soros positivos. O grupo CanLV foi estatisticamente diferente dos demais grupos a p<0,0001. Leish-EVs-ELISA testadas em soros humanos e caninos revelaram excelentes curvas ROC.  Em conclusão, os Leish-EVs liberados por L. (L.) infantum claramente identificam anticorpos de hospedeiros e constituem uma boa metodologia para uso em testes sorológicos.   

Palavras Chave

Leishmania (Leishmania) infantum; vesículas extracelulares; diagnóstico sorológico; leishmaniose visceral humana; leishmaniose visceral canina.