Dados do Trabalho

Título

Detecção molecular de DENV-2 em um município epidêmico do Maranhão, Nordeste do Brasil

Introdução

A dengue é a arbovirose urbana de maior impacto epidemiológico no Brasil e, nos últimos anos tem apresentado expressivo crescimento no número de casos. 

Objetivo (s)

Objetivou-se realizar a investigação molecular de Dengue virus em amostras biológicas de pacientes atendidos na rede pública de saúde de Caxias, Maranhão, Nordeste do Brasil. 

Material e Métodos

Fizeram parte da pesquisa os pacientes sintomaticos de dengue atendidos na Rede Pública do Municipio. O projeto foi submetido e aprovado no Comité de Ética e Pesquisa da UEMA - CAAE: 38376620.0.0000.5554, e aos pacientes que aceitaram participar da pesquisa, foi solicitado o preenchimento do Termo de Consentimento Livre e Esclarecido- TCLE. A coleta do material biológico foi feita no período compreendido entre janeiro a julho de 2019. Foi realizada coleta de sangue venoso por punção percutânea durante o período de viremia pelos próprios profissionais de saúde das respectivas inatituições. Os frascos com sangue coletado foram armazenados em freezer a -80° C, no Laboratório de Entomologia Médica da Universidade Estadual do Maranhão, campus Caxias, até o momento de transporte para o Laboratório de Biologia Molecular, Seção de Arbovirologia e Febres Hemorrágicas do Instituto Evandro Chagas – IEC, no Estado do Pará, para realização das técnicas moleculares. As amostras de sangue foram submetidas à extração do RNA viral, com a utilização do kit PureLink™ RNA Mini Kit (Invitrogen), seguindo orientações do fabricante.  A RT e a PCR foram feitas em um único passo utilizando o kit SuperScript® III Platinum® One-Step qRT-PCR (ThermoFisher Scientific). As amostras foram consideradas positivas quando o valor médio de CT (Cycle Threshold) obtido, foi menor que 37. 

Resultados e Conclusão

Foram analisadas 32 amostras sanguíneas, e em quatro mostras identificadas como: CX159VDAS19 (Ct 29,2), CX64MJBR19 (Ct 31,8), CX143MFCS19 (Ct 30,3) e CX94JLMO19 (Ct 24,6), foi detectada a presença de DENV-2. A circulação do DENV-2 a partir de 2019, associada à circulação de DENV-1 já confirmada no municipio, constitui-se motivo de alerta para os órgãos públicos de saúde sobre a possibilidade de agravamento dos casos. A detecção molecular de DENV-2 em Caxias, constitui-se um achado importante e pode auxiliar a Vigilância Epidemiológica no monitoramento da circulação viral já realizada pelos órgãos públicos de saúde, bem como na caracterização deste arbovírus nesta área. Além disso, estudos mais aprofundados são recomendados para identificar a linhagem circulante na região.

Palavras Chave

dengue; Detecção Viral; Rt-qPCR.